चिकन एड्रेनोमेडुलिन (एडीएम) अभिकर्मक की तैयारी एवं आवश्यकताएँ |
Apr 06, 2021
1. सीरम : कमरा के तापमान पर 10-20 मिनट के लेल जमावट, 2000-3000 आर.पी.एम. सुपरनेटेंट कें ध्यान सं एकत्रित करूं आ अगर भंडारण कें दौरान वर्षा दिखाई देयत छै त ओकरा फेर सं अपकेंद्रित्रित करूं.
2. प्लाज्मा : नमूनाक आवश्यकताक अनुसार एंटीकोआगुलेंट केर रूप मे ईडीटीए वा सोडियम साइट्रेट केर चयन करबाक चाही । 10-20 मिनट तक मिलाने के बाद 2000-3000 आर.पी.एम. सुपरनेटेंट कें ध्यान सं इकट्ठा करूं आ अगर भंडारण कें दौरान वर्षा भ जायत छै त फेर सं अपकेंद्रित्र करूं.
3. मूत्र : बाँझ ट्यूब सं एकत्रित करू, 2000-3000 आर.पी.एम. सुपरनेटेंट कें ध्यान सं इकट्ठा करूं आ अगर भंडारण कें दौरान वर्षा भ जायत छै त फेर सं अपकेंद्रित्र करूं. वक्ष एवं पेट द्रव, सेरेब्रोस्पाइनल द्रव संदर्भ कार्यान्वयन |
4. कोशिका संवर्धन सुपरनेटेंट: एक्सुडेटरी घटक कें पता लगावय कें समय बाँझ ट्यूब कें साथ एकत्रित करूं. 2000-3000 आर.पी.एम.क गति सँ 20 मिनट धरि अपकेंद्रित्रित करू। सुपरनेटेंट सावधानी से इकट्ठा करे|कोशिका म॑ घटकऽ के पता लगाबै प॑ कोशिका निलंबन क॑ पीबीएस (पीएच ७.२-७.४) स॑ पतला करलऽ गेलऽ छेलै, आरू कोशिका केरऽ सांद्रता लगभग १० लाख/एमएल तलक पहुँची गेलऽ छेलै । बार-बार जमना आरू पिघलला के माध्यम स॑ कोशिका के नष्ट होय जाय छै आरू अंतःकोशिकीय घटक छोड़लऽ जाय छै । 2000-3000 आर.पी.एम.क गति सँ 20 मिनट धरि अपकेंद्रित्रित करू। सुपरनेटेंट सावधानी से इकट्ठा करे|यदि संरक्षण कें दौरान वर्षा भ जायत छै त फेर सं अपकेंद्रित्रित करूं.
5. ऊतक नमूना : नमूना के काटला के बाद ओकरा तौलू। पीबीएस, पीएच7.4 कें एकटा निश्चित मात्रा मे मिलाउ. बाद मे उपयोग कें लेल तरल नाइट्रोजन मे तेजी सं क्रायोप्रिजर्वेशन. नमूना पिघलला के बाद 2-8 डिग्री के तापमान पर रहय छै. एक निश्चित मात्रा म॑ पीबीएस (पीएच7.4) मिलालऽ गेलऽ छेलै, आरू नमूना क॑ हाथ स॑ या होमोजेनाइजर स॑ पूरा तरह स॑ होमोजेनाइज करलऽ गेलऽ छेलै । 2000-3000 आर.पी.एम.क गति सँ 20 मिनट धरि अपकेंद्रित्रित करू। सुपरनेटेंट सावधानी से इकट्ठा करे|एकटा कें परीक्षण कें लेल बांटूं आ बाकी कें रिजर्व कें लेल फ्रीज करूं.
6. संग्रहण के बाद जल्द सं जल्द नमूना निकालल जेबाक चाही. निष्कर्षण संबंधित साहित्य के अनुसार करबाक चाही, आ निष्कर्षण के बाद जल्द सं जल्द प्रयोग करबाक चाही. यदि तुरंत परीक्षण नहि कैल जा सकएय छै, त नमूना कें -20 डिग्री पर संग्रहित कैल जा सकएय छै, मुदा बेर-बेर जमएय आ पिघलएय सं बचबाक चाही.
7. NaN3 युक्त नमूना के पता नै लगा सकैत अछि, कियाक त NaN3 HRP गतिविधि के रोकैत अछि।






