संक्रामक गोजातीय राइनोट्रैकाइटिस वायरस एंटीबॉडी एलिसा डिटेक्शन किट

मॉडल सं:VD105E
Abbr.:IBRV अब एलिसा
नमूना : सीरम

वर्णन

विनिर्देश

बीवीडीवी अब एलिसा

इच्छित उपयोग: संक्रामकगोजातीय राइनोट्रैकाइटिस वायरसएंटीबॉडी एलिसा डिटेक्शन किट कें उपयोग करय कें लेल कैल जायत छैसंक्रामक राइनोट्रैकाइटिस निर्धारित करबइन विट्रो में गोजातीय सीरम में वायरस एंटीबॉडी |

नमूना: सीरम

उपलब्ध करायल गेल सामग्री : १.

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus Antibody ELISA Detection Kit

परीक्षण प्रक्रिया एवं व्याख्या

चरण 1 परीक्षण प्रक्रिया

1.1 धोने घोल तैयारी

Working एकाग्रता wराखी तरल: 1।उपयोग सं पहिले धोनाय कें घोल कें कमरा कें तापमान (20-25 डिग्री ) पर बहाल करनाय चाही आ समान रूप सं हिलानाय चाही ताकि इ एक समान भ सकएय. तखन गाढ़ धोनाय कें घोल कें 20 गुना शुद्ध पानी सं पतला करूं (उदाहरण कें लेल, 95ml शुद्ध पानी मे 5ml गाढ़ धोनाय कें घोल मिलाएल जायत छै), नीक सं मिलाऊं, आ पतला धोनाय कें तरल पदार्थ कें 2-8 डिग्री पर 7 दिन तइक संग्रहित कैल जा सकएय छै.

1.2 नमूना तैयार करब

1 पूरा जानवरक कें खून लेल गेलय, 4000rpm पर 10 मिनट तइक अपकेंद्रित्रित कैल गेलय, आ सुपरनेटेंट एकत्र कैल गेलय. सीरम कें बिना हीमोलाइसिस कें प्राकृतिक रूप सं सेहो जमल जा सकएयत छै.

2 सीरम पतला करय वाला सीरम कें 50 बेर पतला करूं (उदाहरण कें लेल: 147ul नमूना पतला करय वाला मे परीक्षण करय वाला सीरम कें 3ul मिलाऊं)।

नोट: नकारात्मक आ सकारात्मक नियंत्रण कें पतला करएय कें जरूरत नहि छै

1.3 परीक्षण प्रक्रिया

1एंजाइम लेबल माइक्रोप्लेट (नमूना कें संख्या कें अनुसार, अलग कैल जा सकय छै आ कई बेर उपयोग कैल जा सकय छै), एंजाइम लेबल माइक्रोप्लेट मे पतला सीरम कें 100ul मिलाऊं, नकारात्मक नियंत्रण आ सकारात्मक नियंत्रण कें लेल दू-दू कुआं सेट करूं, आ प्रतिक्रिया कुआँ मे क्रमशः 100ul डालूं. नमूना कें कुआं मे धीरे सं हिलाऊं, सीलिंग प्लेट फिल्म कें उपयोग सं प्लेट कें ढकूं, आ 37 डिग्री पर 30 मिनट तइक इन्क्यूबेट करूं.

2 सीलिंग प्लेट फिल्म खोलू, प्लेट कुआँ मे घोल कें हिलाऊं, प्रत्येक कुआँ मे 300μl काज करय वाला एकाग्रता कें धोनाय तरल पदार्थ डालूं, आ फेर कुआं मे तरल पदार्थ कें फेंक दिअ. उपरोक्त चरणक कें 5 बेर दोहराऊं, आ अंत मे एकटा साफ शोषक कागज पर पैट ड्राई करूं.

3पतला एंजाइम संयुग्म:एंजाइम संयुग्म (80×) कें 80 बेर पतला करूं (उदाहरण कें लेल: 10ul एंजाइम संयुग्म सांद्र + 790ul नमूना पतला करय वाला, आवश्यक विशिष्ट मात्रा कें गणना परीक्षण नमूनाक कें संख्या कें अनुसार कैल जैतय छै), नीक सं मिलाऊं आ अलग राखूं.

4प्रत्येक कुआँ मे 100μl एंजाइम संयुग्म मिला क प्लेट कें ढक क 37 डिग्री पर 30 मिनट तइक इन्क्यूबेट करूं.

5वाशिंग एंजाइम प्लेट, विशिष्ट ऑपरेशन उपरोक्त 2 के समान अछि |

6प्रत्येक कुआँ मे 100μl सब्सट्रेट घोल मिला कए प्लेट कए ढक कए प्रकाश स 37 डिग्री दूर 10 मिनट तक इन्क्यूबेट करू ।

STEP 2 परिणाम व्याख्या

प्रत्येक कुआँ कें ओडी450 मान 96 कुँआ वाला माइक्रोप्लेट रीडर पर पढ़ल गेलय.

2.1 सत्यापन नकारात्मक नियंत्रण कें औसत OD450nm मान < 0.25 आ सकारात्मक नियंत्रण कें औसत OD450nm मान 0.6 सं बेसि या बराबर छल, प्रयोगात्मक परिणाम वैध छल. अन्यथा परीक्षण दोहराओल जेबाक चाही।

2.2 गणना विधि

प्रत्येक नमूना कें लेल, सुधारल गेल नमूना आ नियंत्रण मान कें उपयोग करयत निम्नलिखित कें अनुसार एस/पी कें गणना करूं:

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2.3 परिणाम व्याख्या

जखन S/P < 0.2 होयत छै तखन एकरा नकारात्मक मानल जायत छै.

जखन S/P > 0.3 होइत अछि तखन एकरा सकारात्मक मानल जाइत अछि ।

जखन 0.2 एस/पी सं कम या बराबर 0.3 सं कम या बराबर होयत छै, तखन एकरा संदिग्ध मानल जायत छै, आ एक सप्ताह बाद नमूना आ परीक्षण दोहरावा कें सुझाव देल जायत छै.

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